隨著免疫分析技術(shù)的發(fā)展,hCG檢測技術(shù)也漸趨成熟。傳統(tǒng)檢測技術(shù)主要是檢測hCGβ亞基的放射免疫分析(RIA),采用hCGβ亞基多克隆抗體測定含β亞基的各種hCG相關(guān)分子(包括規(guī)則和缺刻的hCG、游離β亞基,β核心片段)。隨著技術(shù)的發(fā)展,自動和手動夾心免疫分析(或稱二位相免疫分析)逐漸替代了傳統(tǒng)RIA分析,采用單克隆抗體的混合物檢測相應(yīng)的各種相關(guān)分子,利用熒光免疫、發(fā)光免疫、酶免疫、金免疫等檢測技術(shù)通過精密光譜儀快速檢測。這些方法具備高特異性、高靈敏性、高效性。
過去,同一標(biāo)本出現(xiàn)不同hCG測定值多是因為方法的特異性差,受其它垂體激素的干擾?,F(xiàn)今隨著抗體特異性的提高,免疫測定水平在提高,hCG標(biāo)準(zhǔn)品的高度純化,已很少或不受垂體激素的影響。至今測定hCG的商用藥盒已有幾十種,但由于目前對hCG抗原特性了解不夠充分,對免疫測定利用的單克隆抗體識別的抗原決定簇的分子位點不清,各實驗室使用的檢測抗體所針對的抗原位點常有不同,不同的商用藥盒對測定的分子和測定的方法不同,以及使用的國際標(biāo)準(zhǔn)分子異源性,致使不同檢測之間的結(jié)果可比性仍存在問題,也因此引起一些臨床問題。
比較實驗室常用的多種抗體,發(fā)現(xiàn)hCG和其亞基一般有如下一些抗體結(jié)合位點:規(guī)則hCG有六個(α1、β1、β2、β3、β4、αβ),缺刻hCG是五個(α1、β1、β2、β3、β4),游離β亞基有三個(β1、β2、β4),游離α亞基只有一個(α1),β核心片段則有兩個(β1、β2)。測定時如使用針對αβ、β1兩個位點的夾心法,則只檢測規(guī)則hCG;若使用針對α1、β1兩個位點的夾心法,則能檢測規(guī)則hCG和缺刻hCG。如此,對其他一些成分的檢測,若選用抗體不同,檢測結(jié)果往往存在差異。
針對這些情況,應(yīng)根據(jù)臨床診斷采用相應(yīng)的檢測抗體以檢測有意義的hCG分子。例如,規(guī)則hCG有生物活性,而其他hCG相關(guān)分子一般沒有活性或活性很低,要觀察激素的生物活性,最好檢測規(guī)則hCG;又如游離hCGβ亞基在腫瘤疾病常顯著升高;β核心片段是早期妊娠尿標(biāo)本的重要成分等等。
近期國際腫瘤發(fā)展生物和醫(yī)學(xué)協(xié)會的多中心研究提示,在常規(guī)診斷中,推薦使用廣譜能識別hCG及相關(guān)分子,與其它糖蛋白質(zhì)激素及衍生物低交叉的hCG試驗。最理想的是能識別半胱氨酸結(jié)周圍和hCG-β環(huán)1和環(huán)3頂端的抗原決定簇。
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